新華社上海５月２９日電（記者 仇逸）復旦大學上海醫(yī)學院醫(yī)學分子病毒學重點實驗室主任、上海市公共衛(wèi)生臨床中心兼職教授袁正宏研究員率領的新發(fā)傳染病研究團隊發(fā)現(xiàn)：個別人感染Ｈ７Ｎ９禽流感患者在達菲抗病毒治療１９天后仍在其咽拭子標本中檢測到Ｈ７Ｎ９病毒核酸，這表明病毒已出現(xiàn)基因突變和耐藥趨勢。２９日，這一成果已在線發(fā)表在國際頂尖醫(yī)學雜志《柳葉刀》上，引起世界同行高度關注。
為指導人感染Ｈ７Ｎ９禽流感病例病情判斷、臨床治療及出院等工作，袁正宏領銜的研究團隊承擔了檢測患者標本中Ｈ７Ｎ９病毒核酸載量的重要任務。在上海市公共衛(wèi)生臨床中心應急病房醫(yī)護人員的配合、支持下，收集了病人在治療過程中多個時間點的咽拭子、血液、尿液和糞便標本，使用先進的、自行設計的熒光定量ＲＴ－ＰＣＲ方法對標本中的Ｈ７Ｎ９流感病毒核酸載量進行了定量檢測，并對其中１４例患者進行了病毒載量與病情嚴重程度的相關性分析。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，病癥相對較輕的患者在達菲治療中，咽拭子的病毒載量顯著下降并較快轉(zhuǎn)陰；而重癥患者，特別是在后期需要依靠人工肺治療的患者，咽拭子的病毒核酸載量在達菲治療過程中呈持續(xù)陽性、甚至載量進一步升高的罕見現(xiàn)象，并有個別患者在達菲抗病毒治療１９天后仍在其咽拭子標本中檢測到了Ｈ７Ｎ９病毒核酸。
為解釋這些不尋常現(xiàn)象，袁正宏率領胡蕓文、王蔚、宋志剛等研究人員對Ｈ７Ｎ９禽流感病毒的２個最重要蛋白ＨＡ和ＮＡ，即患者標本中的這２個病毒基因序列進行擴增研究和多態(tài)性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)２例重癥病例在抗病毒治療過程中體內(nèi)Ｈ７Ｎ９毒株的神經(jīng)氨酸酶（ＮＡ）“２９２位氨基酸”從Ｒ（精氨酸）突變?yōu)椋耍ㄙ嚢彼幔?。實驗室運用先進的“Ｑ－ＰＣＲ單核酸多態(tài)性分析法”，有了進一步的發(fā)現(xiàn)：病人標本中“２９２Ｒ毒株”竟然出現(xiàn)了逐漸被“２９２Ｋ毒株”取代的過程。這一結(jié)果提示：這一突變毒株的出現(xiàn)可能與達菲治療效果不佳有關。“ＮＡ Ｒ２９２Ｋ”的突變曾出現(xiàn)在季節(jié)性Ｈ３Ｎ２流感病毒上，以后研究證明該病毒對達菲耐藥。香港大學微生物學家裴偉士教授的科研團隊參與了耐藥基因的發(fā)現(xiàn)和確認工作。
上海市Ｈ７Ｎ９禽流感防治專家組組長、微生物學專家聞玉梅院士認為，研究結(jié)果說明，達菲治療依然對絕大部分患者有效，一旦確診應盡早治療；同時提示在達菲治療前和治療過程中必須要對病毒載量和耐藥基因位點進行密切監(jiān)測，及時調(diào)整治療方案，以提高救治成功率。此外，加快新藥研發(fā)顯得尤為重要。
